Детално објаснување за испарувањето на реагенсот во експериментите со ПЦР

Детално објаснување за испарувањето на реагенсот во експериментите со ПЦР.

Во експериментот PCR, по додавањето на системот за реакција, внимателно го покриваме капакот и постојано потврдуваме дека капакот е затворен за да се избегне испарување на реагенсот. Но, понекогаш и ние имаме сомнежи: потврдивме дека капакот е цврсто затворен, но откако ќе заврши експериментот, реагенсот сепак ќе испари. што е причината?

Всушност, испарливоста на реагенсот е еден од најчестите проблеми во експериментите со ПЦР и има многу фактори кои влијаат на испарлилизацијата на реагенсот.

Испарувањето се однесува на тоа за време на експериментот со ПЦР, растворот за реакција испарува на висока температура, а потоа се кондензира на wallидот на шишето или горниот капак за да формира вода магла или капки вода, или директно се прелева од воздушниот јаз на капачето на шишето или филмот, што резултира Во промена на концентрацијата на растворот за реакција. Промените, количината на раствор на реакција се намали, а некои дури испаруваа до сувост, што резултира во невалидни експерименти.

1. притисок на топол капак, температура

Во експериментите со PCR, обично го загреваме капакот за да спречиме кондензација на пареата на реагенсот. Температурата на загреаниот капак е обично повисока од онаа на растворот за реакција за да се спречи кондензација на пареата.

Караците за топлински циклер за греење можат приближно да се поделат на следниве четири типа: не прилагодливи капаци за греење, прилагодливи капаци за греење, адаптивни капаци за греење и автоматски капаци за греење. Прилагодливиот загреан капак се карактеризира со компресија на затегнување на прстите. Ако не се затегнат цврсто, реагенсите ќе испарат. Испарувањето на работ може да се минимизира со зголемување на притисокот врз загреаниот капак. Понекогаш затегнувањето може да ја закопне цевката и да го извртува копчето. Под нормални околности, електричното покритие за греење на паметното греење може автоматски да открие потрошен материјал од различни височини, автоматски да ги компресира потрошувачките, а притисокот е униформа и константен, со што се намалува испарувањето на реагенсот и рачните грешки и да се подобри експерименталната точност и повторливоста.

2. Деформација на потрошни материјали

За протекување на пареа, повеќето луѓе мислат дека притисокот на жешкиот капак не е доволен. Притисокот на жешкиот капак е многу важен, но тоа е само еден аспект. Всушност, потрошните материјали се исто така многу важни.

ПРОТИВНИ ПРОТИВНИ ПАРТИ Обично се изработени од пластични материјали, кои се шират и деформираат многу откако ќе се загреат. Топлинската стапка на експанзија на металната база PCR што се користи за поставување на плочата за отвори PCR е исклучително ниска, а плочата за отвори PCR не може да се прошири нормално по рамнината по термичката експанзија. Состојбата на испакнатоста ја прави горната топлинска покривка не може целосно да ја контактира површината на плочката за отвори PCR, што резултира во нерамна температура и притисок, предизвикувајќи испарување на реагенсот на работ на плочата за отвори PCR и да влијае на ефектот на откривање на PCR.

3. Потрошувачите не се цврсто запечатени

Затегнатоста на термичкиот капак и потрошувачките не значи дека капачето на цевката PCR е цврсто затворена, а квалитетот на плочата за добро PCR е нерамномерен. Висококвалитетните потрошни материјали, површината на млазницата и капакот се мазни, а заптивката зад капакот на кутијата е добра, и не е лесно да се протекува. Инфериорните потрошни материјали имаат нерамномерни плукања и радијални линии, што лесно може да предизвика истекување или дури и да се исуши.

Затоа, во експериментите со PCR, обидете се да изберете висококвалитетни и соодветни потрошни материјали. Во исто време, системот за реакција може да се прошири за да се минимизира влијанието на испарувањето на системот врз реакцијата.