Прашања за запечатување и загадување во плочи за култура на повеќе клетки

Вчитување и ракување со плочи за култура на мулти-добро клетки:

Плочата за клеточна култура, исто така, го следи принципот на строга асепса при вршење на операции на клетки. Сите операции мора да бидат стандардизирани и научни и нема да предизвикаат дополнително влијание врз растот на клетките. Најчестиот проблем е како да се обезбеди униформност на клетките по додавањето на примерокот и да се минимизира влијанието на промената на медиумот врз состојбата на раст на клетките.

Прашајте:
Капаците од 96 и 24-бунарните плочи или садовите на Петри се многу лабави, што е погодно за вентилација, но дали и бактериите, мувла и други загадувачи?

Одговор:
Капакот е многу лабав, кој припаѓа на полуотворена култура, а целта на ова е да се вентилира (всушност, тоа е да се направи СО2 надвор од садот за култура целосно размена со садот за култура и да ја одржува pH вредноста на културата медиум).
Сè има предности и недостатоци, што секако ја зголемува можноста за загадување. Покрај тоа, ова предизвикува да испари течноста во садот, што е забележително за прецизно дозирање на лекови. Затоа, потребни се следниве две мерки: а. Воздухот во инкубаторот мора да биде чист (редовно ултравиолетово светло, стружење алкохол, а инкубаторот треба да се отвори и да се затвори што е можно помалку) б. Влажноста во инкубаторот секогаш мора да се чува на 100% (мијалникот со стерилна дестилирана вода поставена во инкубаторот).
Исто како и садот Петри, тој е и контејнер со наопаку капак, и нема да биде загаден. Главно заради негативниот притисок на протокот на воздух создаден од „l“ работ на капакот, има микроорганизми прикачени на прашината, а прашината што ја носи протокот на воздухот не може да помине низ работ на капакот што создава негативен притисок. Ефектот на вентилација е само преку дифузија на воздухот и нема да се генерира проток на воздух, така што ќе дише само и нема да навлезе во бактерии.

Прашајте:
Користејќи плоча од 24 бунари, има операции во некои бунари (во ултра чистата клупа), и има клетки што треба да се култивираат во други бунари. Загрижен сум дека ова ќе предизвика загадување. Не знам на што да обрнам внимание?

Одговор:
Ако операцијата е стандардизирана во ултра-чистата клупа, треба да биде добро. Мислам дека можете да го искористите целосното покритие на плочата за култура, да се обидете да ги изложите само дупките што треба да се управуваат и да ги покриете другите дупки со корици.
Размислете сеопфатно пред употреба и искористете ги сите дупки; Ако треба да користите само неколку дупки, можете да користите само една страна, а остатокот да го покриете со капакот. Јас сум навикнат прво да ја користам вистинската дупка (погодно е да додадам примероци на десната рака).

Кога работите, користете неколку стаклени слајдови за да ја подигнете едната страна од таблата, не отворете го капакот целосно, генерално нема проблем.
Нерамна дистрибуција на клетки и решенија

Прашајте:
Клетките се инокулираат на плочата за култура, а клетките секогаш се собираат во периферниот дел, како да се справат со тоа?

Одговор:
Може ли да прашам како се мешаат вашите клетки? Дали е тоа пипетирање или тресење на плочата за култура? Ако тоа е второ, и ако е потресен во круг, многу е веројатно дека клетките ќе бидат фрлени во периферниот дел заради центрифугалната сила, што резултира во помалку клетки во средина. Повеќе од четири недели!
Еве еден добар начин: пред да ја одгледувате семето на плочата, ставете ја плочата за култура во инкубаторот за неколку часа заситеност и потоа извадете ја. Силата треба да биде лесна при садење на клетките. Додавањето полека дозволува суспензијата на клетките да се влева во бунарите на плочата, а култивираните клетки во основа растат рамномерно. Запомнете никогаш да не се тресете со шејкер, или вашите ќелии ќе се соберат заедно како што рековте.
Колку е помал дијаметарот на дупката на плочата за култура, толку е поочигледен овој феномен. Овој феномен е неизбежен за плочи од 24 и 96 бунари, затоа што течноста се придржува на wallидот, така што решението за култура во бунарот не формира течно ниво, но периферијата е висока, исто како конкавно огледало. Меѓутоа, при користење на овие два вида на плочки за отвори, не е можно да се додаде доволно количество на решение за култура заради потребата од дополнителна интервенција, така што клетките ќе се појават „колекција на работ“ заедно со решението за култура. Тоа зависи од тоа кои индикатори треба да ги набудувате. Ако е МТТ, имунохистохемијата ќе влијае на резултатите како резултат на слојот на клетките.
Кога варењето ќелии, обрнете внимание на рамномерно пипетирање за да избегнете грутки на клетките, а количината на решение за култура во бунарот треба да биде доволна. Општо, додадете доволно решение за култура при инокулирање и променете го решението еднаш кога додавате интервенција. Количината на решение за култура додадена на решението за интервенција е еднаква на количината на решение за култура во моментот на инокулација, во овој случај, ќе се подобри феноменот на „сетот на работ“, така што може да го пробате.

Прашајте:
Она што го направив беше експериментот за формирање на плаки. Најдобро е да се шират клетките во униформа слој. Повеќето од дупките се во ред кога вирусот е инокулира, а некои од нив не се униформа. Постојат големи разлики во клеточната група. Би сакал да ве прашам каков метод користите кога додавате ќелии?

Одговор:
Клучно е да се пипета клетките во едноклеточна суспензија по варењето! Осигурете се дека бројот на клетки во секоја бунар е конзистентен при поделување на плочата!
Се разбира, постојат и фактори на обработка. Паралелизмот помеѓу бунарите е исто така многу важна. На пример, кога додавате лек, измешајте го лекот по разредување за да се осигурате дека концентрацијата на секој бунар е конзистентна!
Понатаму, при додавање на клетки и лекови, тест групата и контролната група треба да се додадат за возврат за да се избегне разликата во густината на клетките и концентрацијата на лековите предизвикана од секвенцата на додавање примероци!

Прашајте:
Движењето е веќе униформа, но штицата, 6 дупки и 24 дупки се секогаш малку нерамни, и малку концентрирани во средина. Покрај тоа, очигледно е дека броењето е направено, а по еден или два дена, густината на секоја дупка е различна, што ќе влијае на откривањето. Дали има добар начин?

Одговор:
Ако користите пипета за пастери, не цицајте премногу секој пат, затоа што клетките во пипетата автоматски ќе потонат, честопати бројот на клетки во првите неколку дупки е голем, а суспензијата на клетките е често униформа, а течната волја Следете ја рутата во форма S.
Ако користите пипета, советите треба да бидат обработени и отстранети за да избегнете оштетување на клетките, така што секој пат кога се зема течноста одговара на бунарот. Поточно е да се додаде дупка со еден до еден со врвот. Но исто така обрнете внимание на мешање на суспензијата.

За да поставите паралелна група, n мора да биде доволно голема (можете да ја пресметате).

Не се тресете по позлата, бидејќи тресењето ќе предизвика клетките да се соберат кон центарот. Најдобро е да се штити еднаш.

Плочата за култура на порозни клетки Јонгју Медицин секогаш ја сметаше контролата на квалитетот како живот на претпријатието и го извршуваше континуираното подобрување на конкурентноста на претпријатието. Компанијата секогаш се придржува кон претпријатието дух на почитување на законите и регулативите, строго со самодисциплина, да се биде лесен и да се осмели да ја преземе одговорноста како стандард во работењето, одржувањето и проширувањето на пазарот со одличен квалитет и одлична услуга и исполнување на потреби на клиенти во најголема мерка. . Победа со клиенти е нашата развојна цел. Yongyue Medical! Вашиот доверлив партнер. Ние сме подготвени да соработуваме искрено со вас за да создадеме подобра иднина.